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酶联免疫斑点技术ELISpot将ELISA与细胞培养巧妙结合，实现单细胞水平检测细胞功能，灵敏度比ELISA高2-3个数量级，在肿瘤免疫治疗、疫苗评价、感染性疾病研究等领域应用广泛。

本文基于实验操作一线经验，采用一问一答的形式，系统梳理关键环节的优化方案和问题排查逻辑，重点分享斑点异常的根源及优化建议，细胞制备关键质量控制。

本文我们将以SARS-CoV-2病毒mRNA疫苗研究为例，详细介绍ELISPOT技术在定量检测特异性记忆B细胞频率领域的实验设计思路及操作步骤。

抗原特异性T细胞反应分析已成为许多实验室的常规操作。酶联免疫斑点试验（ELISpot）、流式细胞术（FCM）等依赖抗原刺激的功能性T细胞检测方法，常用肽段来模拟目标抗原。

义翘神州完整的ELISpot实验操作视频，重点关注实验操作细节。快来围观吧！

PBMC的获取无需杀死实验动物，仅需一管外周血即可开展研究，因此在人类免疫学研究、疫苗评价、肿瘤免疫治疗等领域具有不可替代的地位。Dead cell=Dead data，是PBMC的一个重要指标，将直接决定实验结果，尤其是ELISpot。

小鼠脾细胞是WB、ELISpot、流式细胞术等检测的常用细胞样本类型之一，分离、冻存、复苏等操作将影响脾细胞质量，进而影响检测结果。本文详细描述脾细胞制备操作步骤，并聚焦冻存、复苏关键事项。

酶联免疫斑点技术ELISpot将ELISA与细胞培养巧妙结合，实现单细胞水平检测细胞功能，灵敏度比ELISA高2-3个数量级，在肿瘤免疫治疗、疫苗评价、感染性疾病研究等领域应用广泛。

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