ELISpot百万分之一的洞察力：在单细胞水平看见真实的低频免疫应答

目前，已有多项指导原则推荐使用ELISpot检测细胞的免疫反应。例如，CDE发布《新型冠状病毒预防用mRNA疫苗药学研究》，中国食品药品检定研究院发布《预防用DNA疫苗临床前研究技术指导原则》及《预防用以病毒为载体的活疫苗制剂的技术指导原则》。国际艾滋病疫苗行动计划中监测新型HIV疫苗的试验推荐使用ELISpot技术。

IFN-γ是疫苗研发中常用ELISpot检测的一个指标。机体在接种疫苗后，IFN-γ的表达水平直接反映辅助性T细胞的活化状态。ELISpot通过测量T细胞反应能力来定义疫苗效果。通过检测细胞分泌IL-2、TNF-α、IL-4、IL-5等痕量细胞因子的表达水平，可进一步分析免疫反应偏向性，深入理解疫苗引起的免疫应答机制。

ELISpot技术可用于CAR-T产品开发阶段检测T细胞免疫应答功能的测试，比如IFN-γ、IL-2、TNF-α等细胞因子分泌水平评估。Hu等人在开发靶向CD19的CAR-T疗法过程中，利用IFN-γ ELISpot分析11名患者外周血免疫反应情况，结果显示双敲除DKO和低免疫原性HIP的CAR-T细胞未激活T细胞，而野生型WT细胞强烈激活T细胞，并在第28天达到峰值。证实HIP CAR-T细胞不会引发免疫反应，有效逃避免疫系统的排斥反应。

ELISpot检测患者外周血的结果（源自文献：doi: 10.1016/j.stem.2025.07.009）

Kathryn团队通过优化的IFN-γ ELISpot方法，监测腺病毒（AAV）基因疗法的细胞免疫反应情况。在一项AAV5-FVIII基因治疗临床试验中，给药2周后，可在大多数受试者中检测到靶向AAV5衣壳蛋白的免疫反应。

Oxford Immunotec公司基于ELISpot原理开发的T-SPOT.TB结核病诊断试剂盒已获FDA批准，用以定量检测患者血液或体液样品中结核效应T细胞数，判断患者结核分枝杆菌感染状态。它可以代替传统的皮肤测试，并且不受卡介苗接种的影响。

ELISpot技术也可用于自身免疫性疾病的诊断和机制研究中，如I型糖尿病、多发性硬化、重症肌无力、系统性红斑狼疮等，分析异常的免疫细胞激活和细胞因子分泌谱。

ELISpot实验体系需要标准化。细胞活率、抗原刺激条件、阴性与阳性对照、洗板强度、显色时间、读板参数、背景扣除方式等都有可能影响读板结果（SFU值）。

义翘神州ELISpot检测试剂盒正是围绕这一痛点设计。其预包被ELISpot检测试剂盒经PVDF板包被、无菌干燥、真空密封包装等流程制备，可检测IFN-γ、IL-2、IL-4等多种关键细胞因子。试剂盒即用型预包被，具有重复性高、检测流程简单、超高灵敏度等特点，是检测人源或鼠源细胞因子优先考虑的标准化方案。

现在，义翘神州还推出增值服务。购买试剂盒可获得低至100元/板的读板服务。