「WB急救室」99%的实验者可能踩过的SDS-PAGE凝胶八大“雷区”，灵活选择提前配制或现用现配！

1. 漏胶

诊断结果：90%以上是因为玻璃板没有对齐。

优化建议：在锁扣时要保证玻璃板对齐，可以用一手食指指腹按压厚玻璃板一侧上缘，拇指指腹按压薄玻璃板同侧上缘。

玻璃板一定要干燥，有水的玻璃板会吸得很紧，难以对齐。

玻璃板底部缺损、边条密闭性差、塑料夹子太松等也会造成漏胶，可以在灌胶之前用纯水进行测试。

2. 胶不凝

诊断结果：90%以上原因是APS或TEMED失效，也可能是溶液没有混匀。

优化建议：检查试剂有效期，及时更换新的试剂。胶液凝固时间没有想象中的那么快，完全有振荡混匀的时间。

3. 胶凝的不均匀

诊断结果：玻璃板没洗干净，表面有灰尘；试剂有沉淀，没混匀；酒精盖封时加的太快。

优化建议：充分清洗玻璃板，操作过程中戴无尘手套。酒精用移液枪缓慢注入，边加边移动枪头。

4. 胶中有气泡

诊断结果：胶液中有沉淀或不溶物，玻璃板有颗粒，梳子下缘有气泡。

优化建议：充分清洗玻璃板，操作过程中戴无尘手套。凝胶充分混匀，储存液配好后过滤。梳子从一侧慢慢插入。如果是自底部向上出现成串的气泡，可能是胶垫材质所致，改用实心的软胶垫或者加一层保鲜膜。

5. 浓缩胶边缘有缺损

诊断结果：边条老化破损导致。

优化建议：更换新的密封边条。

6. 拔梳子后泳道有胶丝

诊断结果：TEMED用量太多导致胶凝得太快，插梳子之前胶已经部分凝固。

优化建议：减少五分之一的TEMED用量。

7. 拔梳子后泳道歪了

诊断结果：梳子与玻璃板不匹配。

优化建议：在未灌胶前先试梳子是否匹配。

8. 电泳时浓缩胶出现“漏液”

诊断结果：玻璃板与胶局部分离产生了缝隙。

优化建议：取玻璃板时要小心，不能有分离玻璃板

与胶的动作。避免两块凝胶玻璃板直接接触保存。