全能核酸酶SuperNuclease® Pro：不只去除宿主核酸，还有……

全能核酸酶（如SuperNuclease^®）属于非特异性性内切酶，能够高效降解单链、双链、线性和环状DNA及RNA，已广泛用于基因治疗、细胞治疗、重组蛋白/抗体纯化等领域。

在基础研究和生物制药过程中，全能核酸酶并非仅是宿主核酸（DNA/RNA）去除工具。通过梳理前沿文献资料和实际应用数据，其还用于降低裂解液粘度、单细胞悬液制备、组织脱细胞构建、载体构建、表观遗传与结构生物学研究等诸多领域。

随着应用场景的升级，全能核酸酶的性能也需要迭代。SuperNuclease^® Pro（货号：SSNP02）正是为此而来。新一代全能核酸酶能够满足更加严苛的工艺需求，在大多数细胞或病毒收获液中具有更高活性，在多种盐浓度范围内保持高效降解活性。经37℃ 180天验证，其具有强热稳定性，强效抵抗DNA结合蛋白（DBP）对酶活性的抑制效应。

SuperNuclease^® Pro不只活性高，更适应真实工艺环境。

新一代全能核酸酶在常见细胞和病毒收获液中，并在较宽范围的盐离子、Mg²⁺、pH、温度条件下维持活性。验证数据显示，SuperNuclease^® Pro在300-400mM NaCl较高浓度的盐环境浓度中表现出良好酶活性。经过37℃、180天稳定性验证，仍能保持良好的酶活性，为复杂、长周期的生产工艺提供稳定保障。

细胞破碎、慢病毒载体释放，使大分子量核酸进入裂解液，样品出现拉丝、结团或难以移液等不同程度的黏稠，加重后续层析、超滤等纯化步骤的负担。单纯的超声或机械剪切只能将DNA缩短，不能消除核酸的负电荷和吸附能力，仍能与蛋白质、细胞碎片或色谱介质结合。

全能核酸酶能快速将大分子量的核酸水解成2-5个碱基的短链核苷酸，明显降低样品粘度，减少滤膜堵塞及色谱柱压升。Pro核酸酶还能抵抗DNA结合蛋白（DBP）对酶活性的抑制功能，更彻底地清除宿主残留核酸。

因此，在细胞裂解液或病毒收获液处理时，加入SuperNuclease^® Pro，有利于：

组织或细胞消化过程中不可避免地会有一些细胞破裂，进而释放DNA或RNA。这样有可能提高细胞悬液的黏度或聚集成团，堵塞过滤网、降低回收率，还会影响流式细胞、单细胞分析等结果。Yosuke Asano等人在收集小鼠颅骨的成骨细胞时，在胶原酶消化过程中加入核酸酶，明显使悬液黏度和结团下降，最后成骨细胞的数量提高了约3倍。Yi Liu等人在消化缓冲液中加入0.025%的全能核酸酶，在37℃消化50min，成功获得用于流式细胞术分析的小鼠肠道固有层细胞。

全能核酸酶可作为组织解离的辅助试剂，用于优化难分离组织、原代细胞和高碎片样本，提高实验的成功率。不同细胞类型的膜稳定性和培养目的不同，需要根据实际实验条件优化核酸酶的用量和处理时间。

在组织工程与再生医学领域，用于构建器官移植的天然生物支架需要通过“脱细胞”技术彻底去除供体细胞，尤其是具有强免疫原性的宿主基因组核酸，同时还需要保留细胞外基质（ECM）的微管胶原结构。

在一项利用CRISPR-Cas9进行猪异种角膜移植的文章中，研究人员构建“椰油酰谷氨酸钠（SCG）+全能核酸酶（SN）”的新型角膜脱细胞工艺。化学表面活性剂SCG负责溶解和清除细胞膜等脂质成分，SN穿透基质进入细胞核内部将基因组核酸深度消化，使残留DNA含量降至安全标准以下，且不损坏ECM的胶原纤维网，保留角膜的物理透明度和生物力学特性。

脱细胞处理后角膜各项指标评估结果（源自文献：doi: 10.21037/atm-25-3）

更多应用场景：蛋白结构、分子测序

凭借独特的酶学特性，全能核酸梅还被巧用于结构生物学和单分子技术。在利用冷冻电镜（Cryo-EM）解析细胞核提取物中核壳体或核体的高分辨率结构时，通过全能核酸酶进行有限消化（Limited Digestion），可将紧密盘绕的染色质精准剪切为单核体或多核体颗粒，为获得高分辨率结构奠定样品基础。

Zheng Yuan等人以全能核酸酶为主要切割酶构建了SPDFMS单分子测序技术。SuperNuclease高效切割不受保护的DNA片段，以近单核苷酸分辨率保留被蛋白遮蔽的DNA片段，实现对单个RecA核蛋白丝长度的直接测定。创新工具有望用于研究蛋白质-DNA互作。

哪些场景值得尝试？

如果您的实验或生产流程正遇到以下问题，SuperNuclease^® Pro值得纳入评估：

· 常规核酸酶难以充分降解高浓度染色质

· 中高盐条件下酶活明显下降

· 细胞裂解液过于黏稠，影响过滤和纯化

· mNGS样本宿主背景过高，低丰度病原体难以检出

· 需要在不同pH、温度或Mg²⁺条件下保持稳定的核酸降解能力