免疫组化实验避坑：二抗导致的那些问题

切片中心信号强、边缘弱？

背景弥漫性升高？

无信号？

这些免疫组化异常结果，可能与二抗有关。

染色信号忽强忽弱，可能是二抗批次差异大、反复冻融造成的；

背景高，可能是二抗浓度过高、存在交叉反应；

信号弱、假阴性，可能是二抗浓度过低、一抗与二抗种属不匹配。

除此之外，免疫组化的检测系统也会影响染色结果。检测系统试剂盒过期会造成显色底物（DAB）变色，染色信号减弱。检测系统灵敏度过高可能会信号过曝，结构模糊。检测系统聚合物在组织边缘聚集，边缘假阳性增强。