综合性的CAR-T细胞疗法开发解决方案

综合性的CAR-T细胞疗法开发解决方案：覆盖开发全流程

• 四大抗体开发平台高效筛选CAR候选分子	• 无血清培养基使CAR-T细胞规模生产不再是难题
• GMP级细胞因子激活CAR-T细胞的同时安全性更高	• GMP级核酸酶让病毒生产工艺完美兼顾产量和质量
• 高质量靶点蛋白支持scFv筛选和CAR阳性率检测	• 专业细胞库检定服务为CAR-T质量保驾护航

 

自2017年FDA批准CAR-T疗法Kymriah以来，全球已有8款CAR-T药物相继获批上市，其中2款获得NMPA批准。这一前沿的细胞疗法为恶性血液肿瘤的治疗带来了巨大的突破，也为癌症治疗掀起了新的研发浪潮。

作为一家专注于为全球生物医药领域提供关键试剂和技术服务的高新技术企业，义翘神州特地推出了综合性的CAR-T细胞疗法开发解决方案，全方位地支持客户更方便、更快速地完成从早期靶点发现到临床前研究的每一个阶段。

 

 

什么是CAR-T细胞疗法
CAR-T细胞疗法（Chimeric Antigen Receptor T-Cell Therapy），全称为嵌合抗原受体T细胞疗法，是近年来发展非常迅速的一种细胞治疗技术。与传统药物不同，CAR-T疗法是一种“活的”、定制的细胞治疗方法，利用患者自身的免疫T细胞来攻击癌细胞。

CAR-T疗法的整个流程大致可以分为五步：
• 从患者（或同种异体的供体）采集外周血并分离T细胞；
• 利用基因工程技术转导T细胞，给T细胞装上一个“GPS导航系统”，即CAR，这样T细胞就“变身”为CAR-T细胞；
• 将CAR-T细胞进行体外培养和扩增，使其达到符合治疗要求的细胞数量；
• 对CAR-T细胞进行质量检测；
• 把制备好的高质量CAR-T细胞回输到患者体内，靶向杀死癌细胞，同时避免对正常组织的损伤。

CAR-T细胞疗法整体解决方案
针对CAR-T细胞疗法，义翘神州可提供从CAR开发、T细胞激活、慢病毒包装、CAR-T细胞扩增到CAR-T细胞质量控制的完整解决方案，全面支持药企进行CAR-T研究。

CAR开发

CAR是CAR-T的核心部件，如何获得特异性识别肿瘤抗原的CAR是开发的关键。义翘神州拥有噬菌体抗体库、杂交瘤、流式单B细胞、Beacon®B细胞筛选的四大抗体开发技术平台，同时我们提供多种高品质CAR-T靶点蛋白和专业的SPR/BLI亲和力检测服务满足scFv筛选、CAR亲和力测定及后续步骤的需求，加速研究进程。

CAR候选分子开发

CAR的胞外域通常是一个单克隆抗体抗原结合区域的scFv段，其决定了CAR-T是否能特异性识别肿瘤细胞，并在CAR-T细胞的功效和安全性中起重要作用。义翘神州可提供多样化的scFv开发平台，覆盖从抗原设计与制备、动物免疫到获得scFv分子的全部流程，帮助药企客户获得自主知识产权的scFv序列。我们的scFv抗体库构建与筛选平台，成功率达到90%，高通量筛选scFv分子，助力CAR开发。

scFv抗体库构建平台：直接获得scFv序列，高通量筛选scFv分子
Beacon®单B细胞发现平台：最快35天获得scFv序列，一次筛选10,000个以上的B细胞
流式单B细胞发现平台：1天内完成所有B细胞分选，保留天然配对的scFv分子
杂交瘤开发平台：项目成功率>90%，成熟技术获得高特异性scFv分子

CAR候选分子筛选
scFv抗体亲和力检测 （SPR/BLI）

scFv是CAR-T细胞特异性识别肿瘤细胞的关键，其对抗原的亲和力和特异性影响着CAR-T的有效性和安全性。义翘神州SPR/BLI检测平台可高效筛选scFv分子，支持CAR-T药物研发。

• Biacore与ForteBio Octet双检测平台
• SPR平台获得CNAS认证
• 权威检测报告支持CAR-T药物的IND或BLA申报

检测用过表达细胞株构建

义翘神州可提供过表达细胞株构建服务，利用慢病毒载体构建靶抗原过表达稳转株，可以根据客户需要携带多种标记，满足客户流式筛选scFv分子的需求。

• 15+年稳定株开发经验，拥有丰富的成功案例
• 快速交付，2-4月即交付稳定细胞株
• 完善的细胞系开发平台，FACS、qPCR及WB等多种鉴定方法

蛋白表达服务

靶抗原的选择决定了CAR的特异性及有效性等。义翘神州可提供定制化抗原制备服务，包括从基因合成、载体构建到蛋白表达、纯化的一站式服务，充分支持CAR-T细胞治疗研发。

• 四大表达系统：E. coli、哺乳动物、昆虫、HEK293/CHO稳定细胞株开发
• 高通量表达能力，助力CAR-T药物快速发现
• 全面的质控体系：SDS-PAGE、SEC-HPLC、FACS、ELISA、Cell assay等

靶点蛋白

scFv筛选是CAR开发的关键步骤，义翘神州可提供丰富的高质量CAR-T相关热门靶点蛋白产品，全面支持您的CAR-T研究。

• 250+ CAR-T热门靶点蛋白，涵盖荧光定点标记、生物素定点标记（Avi-tag）、无标记等形式
• 高活性验证
• 高批间一致性，保证可重复性的结果

CAR-T细胞制备T细胞激活

从患者外周血中收集、分离得到的T细胞用于改造之前需要先进行活化。最常见的用于T细胞体外活化的是CD3抗体和CD28抗体 。义翘神州已开发GMP级别的CD3以及CD28单克隆激活抗体，纯度高，活性高，超低内毒素（<0.5 EU/mg），经细胞水平验证，可有效激活培养T细胞，更好地助力CAR-T细胞治疗药物开发和生产。

 

GMP级CD3（OKT3）单克隆抗体 （Cat#: GMP-10977-H001）

• 严格按照GMP规范生产，质量标准参照《中国药典》2020版四部
• 高纯度，超低内毒素（<0.5 EU/mg），高生物活性
• 15项质控指标，涵盖支原体、异常毒性、宿主DNA残留、HCP残留等
• 高批间一致性，现货供应

GMP级CD28单克隆抗体（Cat#: GMP-11524-H001）

• 严格按照GMP规范生产，质量标准参照《中国药典》2020版四部
• 高活性，高纯度，高稳定性
• 15项质控指标，涵盖支原体、异常毒性、宿主DNA残留、HCP残留等
• 高安全性，具有无菌、无支原体、超低内毒素（<0.5 EU/mg）等特性

CAR-T细胞制备慢病毒包装

T细胞分离活化完成后，慢病毒包装是进行CAR-T细胞制备的一个关键环节，慢病毒滴度是决定CAR转染阳性率的关键因素。义翘神州可以提供慢病毒包装的关键原材料如Sinofection®转染试剂、无血清HEK293培养基和质粒生产，以及慢病毒纯化工艺过程中用于去除宿主核酸的GMP级核酸酶等。另外，我们也可提供全面的HEK293细胞库检定服务，充分保障CAR-T药物的安全性。

慢病毒包装系统
Sinofection®转染试剂（Cat#: STF02）：高效转染HEK293，达到95%以上，重组慢病毒滴度达10⁷以上
GMP级别SMM 293-CD1培养基（Cat#: M293CD1 ^新品）：化学成分明确、无血清、无动物源；适用于慢病毒包装，更好地支持CAR-T药物开发；配套SMS 293-SUPI加料液（Cat#: M293-SUPI）

核酸去除及检测

宿主DNA残留影响着CAR-T药物的安全性，义翘神州开发的GMP级超级核酸酶和核酸酶残留检测试剂盒，能高效清除核酸并准确定量核酸酶的微量残留。
GMP级超级核酸酶 （Cat#: GMP-SSNP01）：多项严苛的质控指标：内毒素、无菌、支原体、HCP残留、病原体等；高性能：HPLC纯度>99%，酶活>1.1×10⁶ U/mg；核酸酶比活优于国内主要厂家；已完成FDA DMF备案（备案号35978）
核酸酶残留检测试剂盒 （Cat#: KIT-SSNP01）：完整的方法学验证报告；适用性广，可检测不同品牌核酸酶的残留；高灵敏度，检测限最低可达到14.55 pg/mL；高批间一致性

细胞库检测：获得CNAS、ISO 13485和ISO 9001认证；经验丰富，方法成熟，支持中外双报；北京和苏州4200m²双检测中心，就近服务和支持生物医药企业

质粒生产：快速交付，最快3天，严格的质控，灵活的选择：μg、mg、g级

CAR-T细胞扩增

CAR-T细胞可以特异性识别肿瘤抗原来发挥其抗肿瘤活性。相关研究显示联合或单独使用细胞因子，可以增强CAR-T细胞增殖，提高CAR-T细胞抗肿瘤活性。因此，选取不同细胞因子组合或合适的细胞因子来培养CAR-T细胞，可显著增加CAR-T免疫细胞疗效。

GMP级细胞因子
义翘神州致力于开发应用于CAR-T细胞疗法的高质量试剂产品，严格遵循GMP级质量管理体系和药品级放行检测标准，药品级生产环境及生产管理，成功开发了一系列如IL-21、IL-7、IL-15和IL-2等高质量的GMP级别细胞因子，助力细胞治疗药物研发。

 

大规模生产能力

7,000多平米的GMP洁净车间	先进的培养和纯化设备

GMP级别CAR-T培养专用细胞因子

靶点	货号	SEC-HPLC纯度	内毒素	支原体检测	无菌检测	宿主DNA残留	宿主蛋白残留
IL-2	GMP-11848-HNAE	≥95%	< 0.005 EU/μg	Negative	NO Growth	<100 pg/mg	<0.5 μg/mg
IL-7	GMP-11821-HNAE	≥95%	< 0.01 EU/μg	Negative	NO Growth	<100 pg/mg	<0.5 μg/mg
IL-15	GMP-10360-HNAE	≥95%	< 0.01 EU/μg	Negative	NO Growth	<100 pg/mg	<0.5 μg/mg
IL-21	GMP-10584-HNAE	≥95%	< 0.005 EU/μg	Negative	NO Growth	<100 pg/mg	<0.5 μg/mg

 

CAR-T细胞质量控制

CAR-T细胞质量的优劣直接影响临床治疗效果和患者的健康，如不进行严格检测，甚至会危及患者的生命。因此，CAR-T细胞回输到患者体内前需经过严格的放行检测。对CAR-T细胞质量的检测通常包括：1）CAR-T细胞纯度检测；2）CAR-T细胞活性及功能性检测；3）CAR-T细胞安全性检测。

CAR-T细胞纯度检测

检测项目	检测目的	义翘神州解决方案
活细胞比例	检测活细胞比例	2款Annexin V/7-AAD凋亡检测试剂盒（Cat#: APK10448-F；Cat#: APK10448-P）
细胞群或亚群比例	监测CAR-T细胞的分化、耗竭、凋亡等	丰富的流式抗体产品，用于： Pan T细胞占比，CD4+和CD8+占比等 免疫分型检测：Tn、Tscm、Tcm、Tem 活化指标检测：CD25、CD69 耗竭指标检测：PD-1等
目的细胞比例	了解CAR-T细胞产品活性的关键特征	• CAR-T靶点蛋白：特异性好，涵盖荧光定点标记、生物素定点标记（Avi-tag）、无标记等形式 • Protein L：通用型检测 • CAR Linker抗体：通用型检测 • 抗独特型抗体制备服务：专门针对scFv开发，特异性好
非目的细胞比例	检测残留的肿瘤细胞比例	高品质CAR-T靶点抗体：涵盖CD19、CD20、CD22、EGFR、CD3等血液肿瘤和实体瘤热门靶点
杂质	检测细胞因子残留	高品质细胞因子检测试剂盒 • IL-2 ELISA试剂盒（Cat#: KIT11848） • IL-7 ELISA试剂盒（Cat#: KIT11821） • IL-15 ELISA试剂盒（Cat#: KIT10360） • IL-21 ELISA试剂盒（Cat#: KIT10584）

CAR-T细胞活性及功能性检测

CAR-T细胞的功能检测是CAR-T细胞质量控制的重要一环，包括细胞因子检测、细胞多功能性检测、体外杀伤实验和胞内信号转导分析等。义翘神州开发了高质量的细胞因子ELISA试剂盒，可用于检测代表性细胞因子的水平来评估CAR-T细胞对靶细胞的杀伤活性和特异性。同时，我们也可构建稳转肿瘤细胞株，可用于体外评估CAR-T细胞的杀伤活力。

ELISA检测试剂盒

义翘神州自主开发的ELISA试剂盒，品质卓越，广受国内外客户好评，可应用于CAR-T细胞的杀伤活性评估以及CAR-T细胞回输后的CRS监控等。

• 600+种试剂盒，包括人（400+）、小鼠（100+）等。
• 严格遵循八大质控标准，确保检测结果的有效性和可靠性。
• 高灵敏度和高特异性，稳定性好和重复性强。

过表达细胞株构建服务

义翘神州可提供过表达细胞株构建服务，利用慢病毒载体构建Luciferase稳转肿瘤细胞株，用于体外评估CAR-T细胞的杀伤活力。

• 15+年稳定株开发经验，拥有丰富的成功案例。
• 快速交付，2-4月即交付稳定细胞株。
• 完善的细胞系开发平台，FACS、qPCR及WB等多种鉴定方法。

CAR-T细胞安全性检测

CAR-T细胞的微生物安全风险主要来自细菌、真菌、支原体、内外源病毒的污染等。义翘神州遵循NMPA、FDA、EMA、ICH等多个国内外法规和指导原则，可为CAR-T细胞提供无菌检查、支原体检查、内外源病毒污染检查等快速检测方案，全面保证CAR-T药物的安全性。

 

公司资质和实力