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北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)
入驻年限：16 年
- 联系人：
客服部
- 所在地区：
北京
- 业务范围：
技术服务、试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒
- 经营模式：
生产厂商
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Complement component 3重组蛋白|Recombinant Mouse Complement component 3 Protein (His Tag)
品牌：Sino Biological
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一图一文晰解噬菌体抗体库技术
4605 人阅读发布时间：2018-05-08 18:41
噬菌体展示技术是科研和临床应用中人类单克隆抗体生产的有力工具，这种技术主要是基于噬菌体基因工程、利用抗原进行重复筛选以及噬菌体扩增过程。义翘神州利用抗体噬菌体技术研发的第二代兔单抗，表现出极高的亲和性和灵敏度。接下来将分别解说利用噬菌体展示技术生产单克隆抗体的过程（如下图）。
噬菌体展示技术生产单克隆抗体过程
1. 抗体库构建
首先是从选定的细胞来源中提取高质量的 mRNA，然后将 RNA 逆转录得到抗体的轻链（LC）和重链（HC）DNA，将得到的 LC 和 HC 基因 PCR 后与噬菌体载体相连接，然后导入感受态细菌中，对于不完全包含编码噬菌体所需的全部基因的体系，还需要加入辅助噬菌体，最终得到了噬菌体抗体库，每一个噬菌体在壳外可以表达单克隆抗体（mAb），在内包含这个抗体对应的核苷酸序列。
2. 淘选（Panning）
这个过程主要是指利用噬菌体抗体库表面表达的 mAb 与目标抗原结合进行筛选。在每一个淘选过程中，需要经过结合、洗去未结合噬菌体、稀释结合的噬菌体、扩增结合的噬菌体，经过 3 到 4 回合后，淘选到高度特异性的抗体噬菌体。
3. 分析
最终经过淘选得到的噬菌体需要经过噬菌体 ELISA 检测，这个过程主要是在包被有目标抗原的板子上加入噬菌体孵育，洗去未结合噬菌体后，加入偶联酶的噬菌体抗体和酶特异性显色剂，发生显色反应代表噬菌体抗体可以和目标抗原结合。义翘神州供应现货噬菌体 M13 的抗体（biotin 偶联、HRP 偶联和非偶联），可以为您在利用噬菌体展示技术制备抗体中提供帮助。
将可以显色的噬菌体挑选出来用于单克隆噬菌体的生产，再次利用噬菌体 ELISA 检测后，对阳性反应的噬菌体进行核苷酸测序，得到抗体各片段的核苷酸序列后进行一系列基因分析。同时利用噬菌体扩增制备 mAb，进而进行一系列下游检测分析，如 ELISA、免疫荧光（IF）、免疫印迹分析（WB）、免疫沉淀（IP）……
噬菌体抗体库技术为在体外筛选任意特异性的单克隆抗体提供了可能，极大地为科学研究、临床诊断以及医药研究提供了助力。
参考文献：Hammers CM, Stanley JR. Antibody Phage Display: Technique and Applications. The Journal of investigative dermatology. 2014;134(2):e17.
噬菌体展示技术生产单克隆抗体过程
1. 抗体库构建
首先是从选定的细胞来源中提取高质量的 mRNA，然后将 RNA 逆转录得到抗体的轻链（LC）和重链（HC）DNA，将得到的 LC 和 HC 基因 PCR 后与噬菌体载体相连接，然后导入感受态细菌中，对于不完全包含编码噬菌体所需的全部基因的体系，还需要加入辅助噬菌体，最终得到了噬菌体抗体库，每一个噬菌体在壳外可以表达单克隆抗体（mAb），在内包含这个抗体对应的核苷酸序列。
2. 淘选（Panning）
这个过程主要是指利用噬菌体抗体库表面表达的 mAb 与目标抗原结合进行筛选。在每一个淘选过程中，需要经过结合、洗去未结合噬菌体、稀释结合的噬菌体、扩增结合的噬菌体，经过 3 到 4 回合后，淘选到高度特异性的抗体噬菌体。
3. 分析
最终经过淘选得到的噬菌体需要经过噬菌体 ELISA 检测，这个过程主要是在包被有目标抗原的板子上加入噬菌体孵育，洗去未结合噬菌体后，加入偶联酶的噬菌体抗体和酶特异性显色剂，发生显色反应代表噬菌体抗体可以和目标抗原结合。义翘神州供应现货噬菌体 M13 的抗体（biotin 偶联、HRP 偶联和非偶联），可以为您在利用噬菌体展示技术制备抗体中提供帮助。
将可以显色的噬菌体挑选出来用于单克隆噬菌体的生产，再次利用噬菌体 ELISA 检测后，对阳性反应的噬菌体进行核苷酸测序，得到抗体各片段的核苷酸序列后进行一系列基因分析。同时利用噬菌体扩增制备 mAb，进而进行一系列下游检测分析，如 ELISA、免疫荧光（IF）、免疫印迹分析（WB）、免疫沉淀（IP）……
噬菌体抗体库技术为在体外筛选任意特异性的单克隆抗体提供了可能，极大地为科学研究、临床诊断以及医药研究提供了助力。
参考文献：Hammers CM, Stanley JR. Antibody Phage Display: Technique and Applications. The Journal of investigative dermatology. 2014;134(2):e17.