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回顾2023年类器官研究进展,分享3D类器官研究解决方案

人阅读 发布时间:2024-02-26 09:40

2023年类器官发展趋势
类器官更接近真实器官
实现类器官免疫微环境构建
疾病类器官更准确地模拟疾病特征
类器官逐渐成为药物研发的关键工具,产业化加速推进

类器官技术已经成功构建几乎所有的组织器官,如肾、肝、肺、肠、脑、前列腺、胰腺和视网膜等。通过对器官发生过程、干细胞生态位组成及自组装调控机制理解的不断加深,研究人员优化培养条件,构建出细胞组成更加多样化、结构功能更接近真实器官的类器官。

2023年,Meier等通过人多能干细胞构建包含心外膜的心脏类器官,可模拟人类心脏发育、疾病和再生的过程,Sasha Mendjan等建立多房室心脏类器官,模拟包括右心室和左心室、心房、流出道、房室管结构,为心脏疾病研究提供了全新的工具。

多房室心脏类器官(图片源自参考文献:Multi-chamber cardioids unravel human heart development and cardiac defects.

西湖大学蔡尚团队构建生理结构更完善、稳定性更高的小鼠乳腺类器官,具有展现更复杂生理、病理过程的潜能,为乳腺干细胞的功能性研究、微环境互作研究,以及肿瘤发生的早期病理过程研究提供了有力工具。

如何构建具有结缔组织、血管和免疫细胞的微环境一直类器官研究的重点难题。2023年,研究人员在类器官免疫微环境构建方向取得重要进展。Carine等将来源于多能干细胞的人类肠道类器官(HIOs)移植到具有人源化免疫系统小鼠的肾囊中,成功建立了具有功能性人体免疫组织的下一代HIOs体内模型。James等人通过培养多能干细胞衍生的人结肠类器官(HCO)共同发育出多种免疫细胞群,包括造血内皮(HE)样细胞和红骨髓祖细胞,它们经历典型的分化步骤,从而产生功能性巨噬细胞。这些研究获得的肠道类器官能够更真实模拟炎症性肠病等疾病的发生发展过程,为相关机制研究提供了重要模型。

肠类器官与免疫细胞协同发育(图片源自参考文献:Development of functional resident macrophages in human pluripotent stem cell-derived colonic organoids and human fetal colon
 
通过基因改造复制疾病特异性的特征,或直接使用患者来源、保留病理突变的细胞构建疾病类器官也是该领域重点研究的方向之一。其中,肿瘤类器官构建发展最快,目前已经成为一种直观、高效的肿瘤机制研究和治疗测试模型,据统计全球范围内已建立43个肿瘤类器官生物样本库。
 
义翘神州3D类器官研究解决方案

1  类器官培养与分化
类器官研究的快速发展,是基于研究人员开发了一系列的培养策略。根据细胞来源不同以及最终的分化类型不同,需要在类器官培养过程中添加不同组合的细胞因子,以促进或抑制参与类器官形成的信号通路,获得所需的类器官。

义翘神州开发了一系列重组生长因子,具有高活性、低内毒素、高批间一致性和高纯度等特点,以实现类器官的最佳生长,并确保获得重复性好的实验结果。这些产品经过多个客户的类器官平台验证,产品质量已获得市场的充分认可!

 
人胎儿甲状腺类器官培养
人胎儿甲状腺类器官培养过程及免疫荧光双标记检测结果,培养基中添加来自义翘神州的EGF细胞因子(货号:10605-HNAE)。
来源:https://doi.org/10.1002/advs.202105568

结直肠癌类器官培养

0 天和第 24 天结直肠癌类器官对 5-Fu 的治疗反应。(A)对 5-Fu 敏感的类器官;(B)对 5-Fu 耐受的类器官。
义翘神州产品助力类器官培养:RSPO1(货号:11083-HNAS)、NOG(货号:50688-M02H)、EGF(货号:50482-MNCH)。

来源: https://doi.org/10.3389/fonc.2022.855674


(B) 不同形态的 mCRC 类器官培养过程;(C)原发肿瘤和患者衍生类器官的组织病理学特征。
义翘神州产品助力类器官培养:RSPO1NOGEGF

来源: https://doi.org/10.3389/fbioe.2023.1190637

类器官培养与分化
类器官培养成功后,需对其进行评估和验证,以确保类器官与目标器官或组织具有一致性,这是类器官后续应用的重要前提。主要采用的类器官鉴定方法包括H&E染色、免疫组化、免疫荧光、单细胞测序等多种方法进行评估,从形态学、组织病理学及分子遗传学等多角度进行验证。
 
产品验证数据展示  
Anti-Ki67/MKI67 Antibody, Mouse Monoclonal, Cat: 100130-MM19

Immunochemical staining of human KI-67 in human lung cancer with mouse monoclonal antibody(1:60, formalin-fixed paraffin embedded sections).

Recombinant Anti-p63 Antibody, Rabbit Monoclonal, Cat: 100266-R143

Immunochemical staining of human P63 in human breast carcinoma with rabbit monoclonal antibody (1:200, formalin-fixed paraffin embedded sections).

Recombinant Anti-EpCAM/TROP1 Antibody, Rabbit Monoclonal, Cat: 10694-R028

Immunofluorescence staining of Human EpCAM in SKBR3 cells. Cells were fixed with 4% PFA, blocked with 10% serum, and incubated with Rabbit anti-Human EpCAM monoclonal antibody (1:500) at 4overnight. Then cells were stained with the Alexa Fluor® 488-conjugated Goat Anti-rabbit IgG secondary antibody (green) and counterstained with DAPI (blue). Positive staining was localized to plasma membrane.
 
类器官领域正处于技术爆发和科研成果井喷的阶段,发展进入快车道。如何培养目的类器官?如何对类器官进行正确的分析和鉴定?是决定类器官研究成功的基石。义翘神州结合实际案例,整合资源,制定出全面的《3D类器官研究解决方案》,欢迎大家了解关注!
 
【参考文献】
1. Schmidt C, et al. Multi-chamber cardioids unravel human heart development and cardiac defects. Cell, 2023, 186: 5587-605
2. Meier AB, et al. Epicardioid single-cell genomics uncovers principles of human epicardium biology in heart development and disease. Nat Biotechnol, 2023, 41: 1787-800
3. Gribaudo S, et al. Self-organizing models of human trunk organogenesis recapitulate spinal cord and spine co-morphogenesis. Nat Biotechnol, 2023, doi: 10.1038/s41587-023-01956-9
4. Smirnova L, et al. Organoid intelligence (OI): the new frontier in biocomputing and intelligence-in-a-dish. Front Sci, 2023, 1: 1017235
5. Bouffi C, et al. In vivo development of immune tissue in human intestinal organoids transplanted into humanized mice. Nat Biotechnol, 2023, 41: 824-31
6. Múnera JO, et al. Development of functional resident macrophages in human pluripotent stem cell-derived colonic organoids and human fetal colon. Cell Stem Cell, 2023, 30: 1434-51
7. Xie X, Li X, Song W. Tumor organoid biobank-new platform for medical research. Sci Rep, 2023, 13: 1819
8. Geurts MH, et al. One-step generation of tumor models by base editor multiplexing in adult stem cell-derived organoids. Nat Commun, 2023, 14: 4998
9. Tebon PJ, et al. Drug screening at single-organoid resolution via bioprinting and interferometry. Nat Commun, 2023, 14: 3168
10. Jianqing Liang, et al. Modeling Human Thyroid Development by Fetal Tissue-Derived Organoid Culture. Advanced Science, 2022. https://doi.org/10.1002/advs.202105568
11. Lifeng Chen, et al. Molecular Biomarker of Drug Resistance Developed From PatientDerived Organoids Predicts Survival of Colorectal Cancer Patients. Front. Oncol, 2022. doi: 10.3389/fonc.2022.855674
12. Xingfeng He, et al. Patient-derived organoids as a platform for drug screening in metastatic colorectal cancer. Front. Bioeng. Biotechnol. , 2023. doi: 10.3389/fbioe.2023.1190637

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