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科研人员成功构建一种新冠抗原LFA检测技术,义翘神州抗体对表现优秀

人阅读 发布时间:2020-09-01 11:19

新冠病毒检测技术发展迅猛,全球各地的研究人员开发了超过200多种诊断检测方法,目的是不断提高检测精度,缩短检测时间,满足现场检测的应用。目前新冠病毒检测根据生物标记物,大致可以分为两类:基因检测,以及血清学和抗原检测。从技术上来分类,可以分为分子诊断(MDX)和侧向流动检测(LFA, Lateral Flow Assay)。LFA抗原检测每年具有数十亿单位的生产能力,相对便宜,易于使用,在几分钟内就可以知道结果。
构建LFA检测的关键步骤是筛选合适的抗体,本研究选择21种抗核衣壳蛋白抗体进行随机组合配对,其中有8种抗体来自义翘神州。将673对抗核衣壳抗体对作为捕获和检测试剂,查找对新冠病毒核衣壳蛋白的表位亲和力佳,能用于LFA检测的合适抗体对。通过四轮测试,研究人员确定了几个候选抗体对,这些抗体对将进一步用于开发新冠病毒的LFA检测。








































从图中我们可以看出,来自义翘神州(Sino Biological)几种核衣壳抗体表现较佳,在四轮测试中,不管是用做捕获试剂还是检测试剂,均有排名在前五的抗体或抗体对,尤其是在第一轮测试中,前五名抗体对基本来自义翘神州。这些抗体包括抗SARS-CoV/SARS-CoV-2核衣壳蛋白鼠单抗(Cat: 40143-MM08Cat: 40143-MM05)和兔单抗(Cat: 40143-R001Cat: 40143-R004)。
在第一轮筛选中选择大肠杆菌表达的单体核衣壳蛋白,而在之后的三轮筛选中选择HEK293细胞表达的糖基化核衣壳蛋白。哺乳动物细胞表达的蛋白质最有可能显示来自受感染的人类细胞的病毒蛋白所表达的生物学相关模式。第三轮将NP抗原的浓度从50 ng/mL降低到25 ng/mL,以筛选表现更好的产品。第四轮将抗原浓度从25 ng/mL降至10 ng/mL。通过四轮测试,发现第33对和第70对抗体组合重复出现在多轮筛选的前五名。

为了验证高、中、低三组样本之间的差异,利用6SARS-CoV-2阳性、3SARS-CoV-2阴性和2例潜在冠状病毒交叉反应样品进行抗体对筛选。结果如下表,义翘神州的抗核衣壳抗体同样表现优秀

在本次研究中对673对抗SARS-COV-2核衣壳蛋白的抗体对进行筛选,获得几个商品化的候选抗体用来开发检测新冠病毒LFA技术。本文研究是开发LFA检测的必要步骤,但还属于实验室阶段,用于体外检测还需要进一步的工作。本次研究获得了全球公益基金和全球健康实验室的资助。后者属于盖茨基金会创建的非营利性组织,旨在开发创新的解决方案。
在本次研究中共选择8种义翘神州的鼠或兔抗体进行筛选,在多种组合中都有优异的表现。如果您需要了解更多抗体信息,可以扫描下方图片中的二维码。


参考文献:
David Cate, et al. Antibody Screening Results for Anti-Nucleocapsid Antibodies Towards the Development of a SARS-CoV-2 Nucleocapsid Protein Antigen Detecting Lateral Flow Assay. ChemRxiv.



 

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