随着FCM的不断发展和完善，它在医学及其他学科的应用也更加深入和广泛，涵盖了从基础研究到临床诊断的多个方面，涉及血液学（白血病免疫分型）、免疫学（淋巴细胞亚群检测）、肿瘤学（肿瘤标志学、循环肿瘤细胞及肿瘤干细胞检测）、细胞生物学、遗传学和微生物学等领域。

 

• FCM在白血病诊断研究方面的应用

 

流式细胞免疫分型已经成为血液系统肿瘤诊断、分类及监测的重要工具。FCM通过对骨髓细胞或外周血细胞表面抗原和DNA的检测分析，在急性白血病的诊断和鉴别中有着举足轻重的作用。FCM的细胞免疫分型是国际公认的诊断造血细胞疾病必不可少的重要标准之一，也是目前被广泛接受和认可的免疫分型方法。

 

各种血细胞系都有其独特的抗原，FCM以单克隆抗体（McAb）为分子探针，借助荧光素（APC、FITC、PE等）可对白血病细胞的胞膜、胞浆或胞核的免疫表型进行多参数分析，从而了解白血病细胞所属的细胞系列及分化程度。测定DNA倍体及进行细胞周期分析对治疗白血病有一定指导作用，不同患者或同一患者在不同时期细胞增殖状况不同，定期了解增殖情况以采取相应药物可以提高疗效。

 

在白血病免疫分型方面，国内外均主张采用FCMCD45/SSC（SideScatter，侧向角散射）双参数散点网设计法进行分型，这种方法可以将骨髓细胞清晰地分成成熟粒细胞、淋巴细胞、幼稚细胞、单核细胞和有核红细胞群，排除了正常细胞对免疫分型的干扰，可以显著提高细胞免疫分型的准确性。

 

• FCM检测淋巴细胞亚群

 

FCM利用其强大的荧光标记技术，可同时检测一种或几种淋巴细胞的表面抗原，从而区分不同功能的淋巴细胞亚群。常检的淋巴细胞亚群包括T细胞（CD3+CD4+、CD3+CD8+）、B淋巴细胞（CD19+CD20+）及NK细胞（CD16+CD56+）等。通过对不同淋巴细胞亚群的相对、绝对计数以及比率观察，可以评估感染性疾病（AIDS/HIV）、免疫性疾病及肿瘤等疾病状态下机体的免疫状况，从而辅助诊断、判断病情变化。

 

• FCM在肿瘤临床诊断研究方面的应用

 

利用FCM对肿瘤细胞各参数进行检测、分析，可以进一步提高肿瘤诊断的研究水平。如，通过对肿瘤细胞DNA倍体分类，研究肿瘤细胞的生物学特性；对肿瘤细胞的细胞周期、增殖活性、细胞凋亡水平及细胞分化等进行分析，探讨肿瘤细胞动力学标志的特征；分析肿瘤细胞各基因如癌基因，抑癌基因，肿瘤转移相关基因等表达水平，可以研究肿瘤细胞基因表达特征等。FCM的出现使肿瘤的诊断治疗有了质的飞跃。

 

FCM可以检测肿瘤细胞的增殖活性标志分子、分化/凋亡标志分子等，用于研究肿瘤的发病机制、制定个性化治疗方案以及进行预后判断。通过FCM检测细胞DNA含量，是FCM对肿瘤标志物研究中结论最明确、应用价值最大的研究成果之一。通过对DNA进行染色标记，可以精确测定其含量的变化。细胞DNA含量发生异常改变或DNA非整倍体细胞群的出现，可作为细胞发生癌变或具有恶性潜能的癌前病变的重要标志。

 

FCM凭借其独特的检测原理及强大的荧光标记技术仍将在肿瘤诊断研究中发挥重要作用。不久的将来，FCM将与组织学诊断、分子诊断等更完美的结合在一起，为临床诊断提供更准确、完整的信息。但是，不得不承认，我国FCM的应用研究迟于国外近10年，发展时间较短，还存在许多缺陷和不足，如FCM设备和试剂问题，FCM质量管理问题等，需在以后的发展中不断优化和完善。

 

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图源：北京义翘神州

 

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