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北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)
入驻年限：16 年
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北京
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技术服务、试剂、抗体、细胞库 / 细胞培养、ELISA 试剂盒
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Complement component 3重组蛋白|Recombinant Mouse Complement component 3 Protein (His Tag)
品牌：Sino Biological
￥4520 - 29350
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当蛋白研究遇上蛋白标签，So easy!
3658 人阅读发布时间：2019-04-08 10:33
蛋白研究离不开抗体试剂。然而，虽然抗体生产商每年推出大量抗体新品，许多蛋白仍然没有相应的抗体产品。面对这种困境，科研工作者该怎么办呢？值得庆幸的是，使用蛋白标签可以有效地解决这个难题。
常用蛋白标签，了解一下
蛋白标签是利用 DNA 体外重组技术，在蛋白表达载体插入一段特定的基因序列，可以与目的蛋白一起融合表达的一种多肽或蛋白，便于目的蛋白表达、检测、示踪和纯化等。常见的蛋白标签有 His、GST、HA、Myc、DYKDDDDK（Flag®）、GFP 等（蛋白标签的序列及分子量详见表 1）。
| 蛋白标签 | 标签序列 | 分子量（kDa） |
| His 标签 | HHHHHH | 0.8 |
| HA 标签 | YPYDVPDYA | 1.1 |
| Myc 标签 | EQKLISEEDL | 1.2 |
| DYKDDDK | DYKDDDK | 1 |
| GST 标签 | - | 26 |
| GFP 标签 | - | 26.9 |
| V5 标签 | GKPIPNPLLGLDST | 1.4 |
| S-tag | KETAAAKFERQHMDS | 1.8 |
| E-tag | GAPVPYPDPLEPR | 1.4 |
| EGFP 标签 | - | 32.7 |
His 标签是一种分子量很小的蛋白标签，通常由 6 至 10 个组氨酸（His）残基组成，融合到重组蛋白后，对蛋白的结构和特性几乎没有影响，因此一般纯化后无需去除标签，非常简单方便。由于组氨酸残基侧链与固态镍具有强烈的吸引力，故 His 标签蛋白可使用金属螯合亲和层析 （IMAC）进行纯化。
DYKDDDDK（FLAG® 表位标签）含有 8 个氨基酸，分子量为 1.0 KDa。DYKDDDDK 标签具有亲水性，因此一般定位于融合蛋白表面，可以更好地与抗体结合。肠激酶专一识别该肽序列 C 末端的 5 个氨基酸残基，故可通过加入肠激酶处理去除该标签。
GST 标签是常用的亲和标签之一，含有 220 个氨基酸，分子量约为 26 KDa。GST 标签最适合用于原核表达系统，因为 GST（谷胱甘肽-S 转移酶）是天然存在于真核细胞的蛋白，但通常不存在于细菌中。由于 GST 蛋白属于可溶性蛋白，可增加目的蛋白的可溶性，并且提高在大肠杆菌中的表达。另外，GST 标签可用于 pull-down 实验，研究蛋白间的相互作用。
GFP（Green fluorescent protein, 绿色荧光蛋白）标签含有 238 个氨基酸，分子量约为 26.9 KDa，最先是 1962 年下村修等在维多利亚多管发光水母（Aequorea victoria）中发现的。GFP 标签在紫外线的照射下会发出绿色的荧光，而且与靶蛋白融合后不会显著地影响天然蛋白质的组装和功能。
以上简单介绍了蛋白标签，可是下一步如何检测这些标签蛋白呢？这时候轮到标签蛋白的“好基友”——标签抗体，出场了。标签抗体可高度特异性地识别这些蛋白标签，从而实现对目的蛋白的纯化和检测。如图 1 义翘神州的 His 标签抗体（货号：105327-MM02T）能特异性地识别 N 末端、C 末端和中间的 His 标签。
图 1：免疫印迹分析法检测 His 标签蛋白
A-G：N 末端带 His 标签的蛋白样品；H-M: C 末端带 His 标签的蛋白样品；N-P: 中间位置带 His 标签的蛋白样品
为满足广大科研用户的需求，义翘神州还相继开发了 9 种高质量的标签抗体。目前“标签抗体2折大促”活动正在进行中，更有细胞因子、内参抗体和二抗等，供您一站式选购。详情请咨询 400-890-9989 或者访问 cn.sinobiological.com