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北京义翘神州科技股份有限公司(Sino Biological Inc.)
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His Tag 抗体,你选对了吗?
人阅读 发布时间:2018-03-07 07:57
His Tag 抗体,你选对了吗?
His Tag 是蛋白质重组技术中经常用到的一种标签,是由 6 个组氨酸 (His-His-His-His-His-His) 组成的短肽,其特点是分子量较小,基本不改变蛋白质的生物结构,不改变蛋白质的溶解性,更重要的是它使蛋白质的分离和纯化变得极为方便。 另外,与其他标签相比,His Tag 有很多明显优势,是目前用于蛋白纯化的首选标签。
His Tag 抗体可以用来鉴定 His Tag 融合蛋白的表达情况(如目的蛋白的相对表达量、分子量)、在细胞中的定位以及其它特性。但市场上的 His Tag 抗体质量良莠不齐,需要科研工作者睁大眼睛仔细甄别。
因此,为了买到质优价廉的 His Tag 抗体,在选购时,需要从以下 4 个方面考虑:
His Tag 抗体可以用来鉴定 His Tag 融合蛋白的表达情况(如目的蛋白的相对表达量、分子量)、在细胞中的定位以及其它特性。但市场上的 His Tag 抗体质量良莠不齐,需要科研工作者睁大眼睛仔细甄别。
因此,为了买到质优价廉的 His Tag 抗体,在选购时,需要从以下 4 个方面考虑:
- His Tag 抗体适用于哪些应用;产品的应用类型越多,在具体实验中的选择余地就越大。
- His Tag 抗体克隆性:单克隆还是多克隆;单克隆抗体的特异性优于多克隆抗体,可避免使用多克隆抗体造成的非特异性反应。
- His Tag 抗体制备来源:鼠源还是兔源;目前市场上的 His Tag 抗体鼠源较多,也有部分兔源 His Tag 抗体,可根据实验需要选择。
- His Tag 抗体的效价高低。一个效价高的 100 μL His Tag 抗体(假设其 WB 检测的推荐稀释比是 1:1000,最终使用液相当于 100 mL),要比效价低的 200 μL His Tag 抗体(假设 WB 检测的稀释比是 1:200,最终使用液相当于 40 mL)性价比更高。
目前国内外有很多公司都提供商品化的 His Tag 抗体,科研工作者可根据实验室的经费和具体的实验需要来选购合适的 His Tag 抗体。其中,北京义翘神州科技有限公司的产品质量稳定,是广大科研工作者在攀登学术高峰时的好帮手。下图是His Tag鼠单抗(货号:105327-MM02)识别不同位置 His Tag 的 Western blot 结果。
N末端 His Tag A: His- CLEC7A B: His- LYPLA2 C: His- COCH |
C末端 His Tag A: ALPL-His B: IL2Ra-His C: IL6R-His |
氨基酸序列中间 His Tag A: TrxA-His-EK-APOE B: TrXA-His-EK-BCL6 C: TrxA-His-EK-SOCS3 |
此外,还验证了在不同表达系统如 HEK293 细胞、E.coli、昆虫细胞等中,这款 His Tag 鼠单抗能很好地识别带有 His Tag 的融合蛋白。具体 Western blot 实验结果如下图所示。
HEK293 细胞 A: 阴性对照 B: His-LYPLA2 细胞裂解液 C: His-AKR1C2 细胞裂解液 D: LILRA3-His 细胞裂解液 |
E.coli A: 阴性对照 B: M2E1-His 细胞裂解液 C: His-sSPA 细胞裂解液 D: His- GH1 细胞裂解液 |
昆虫细胞 A: 阴性对照 B: His- LYPLA2 细胞裂解液 C: AZGP1-His 细胞裂解液 D: IL2Ra-His 细胞裂解液 |
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