仅需12步，助你做出完美免疫组化IHC片子

温故而知新

今天翘仔将梳理免疫组化（IHC）实验的12步经典操作，逐个击退IHC实验道路上的“拦路虎”，让萌新打好基础，老手巩固知识，带着满满的干货轻松愉快的搞定免疫组化。

IHC作为免疫学实验的“三件套”之一，广泛用于基础研究和临床病理诊断。基础研究中，IHC可确定细胞内的抗原，及进行定位、定性和定量分析。临床病理诊断，IHC可用于确定肿瘤的来源、分类和评估预后效果。

什么是IHC?

做实验就要铭记原理，做到胸有成竹。简而言之，免疫组化IHC是利用抗原抗体反应确定组织细胞内抗原，并通过染色实现可视化。

实验原理

IHC是一种能让我们在组织切片中找到目的蛋白的超级强大技术。IHC技术为我们打开了一扇窗，直接观察蛋白质在细胞和组织中的精准定位。IHC看似简单，操作过程中却存在许多变量。每次开始实验之前，我们都应该来一次“扪心自问”。

 

实验必备

 

根据不同的染色步骤、标记物和结合方式，IHC染色方法多样，比较常用的有间接法、酶标法、免疫荧光法等。

IHC实验分类

为了提高IHC检测的灵敏度和特异性，操作步骤不断更新换代，但最主要的还是一抗的质量。义翘神州推出近百种病理验证免疫组化抗体，均为高特异性单克隆抗体。

那么如何进行IHC实验呢？一切都要从制备样本开始，当抗原表达水平较高时，冷冻切片、丙酮固定的组织是最佳的选择；而需要保护细胞形态时，往往选择福尔马林固定、石蜡包埋的（FFPE）样本。石蜡切片的IHC实验一般包括12个步骤：取样、固定、包埋、切片、脱蜡水化、抗原修复、灭活、封闭、一抗孵育、二抗孵育、显色、封片观察。操作繁琐，只需静下来慢下来，一定会做出满意的结果！

为助力IHC研究，义翘神州为大家整理了一份详细IHC操作指南，Protocol干货满满，欢迎大家下载交流和学习。